ICG-乳铁蛋白 吲哚菁绿标记乳铁蛋白 ICG-Lactoferrin

文章来源 : 齐岳生物

作者:小编zyl

发布时间 : 2026-03-16 14:30:26

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产品名称:ICG-乳铁蛋白 吲哚菁绿标记乳铁蛋白 ICG-Lactoferrin

产品描述:

ICG-乳铁蛋白 吲哚菁绿标记乳铁蛋白 ICG-Lactoferrin

一、产品概述

ICG-Lactoferrin(Indocyanine Green-Lactoferrin,吲哚菁绿标记乳铁蛋白) 是一种将 近红外荧光染料吲哚菁绿(Indocyanine Green, ICG) 与天然铁结合蛋白 乳铁蛋白(Lactoferrin, LF) 共价偶联而形成的荧光标记蛋白。乳铁蛋白广泛存在于乳汁及体液中,具有 铁离子结合、*菌、免疫调节、*炎及*氧化 等多种生物活性。

ICG 是一种 FDA 批准的近红外(NIR)荧光染料,激发波长约为 780 nm,发射波长约为 810–830 nm。通过将 ICG 与乳铁蛋白偶联,可实现 近红外成像,提高生物组织穿透深度,并减少自体荧光干扰。ICG-Lactoferrin 因其稳定的荧光性能和保留乳铁蛋白的生物活性,被广泛应用于 细胞成像、受体介导内吞研究、血脑屏障递送研究以及体内近红外成像。

该产品结合了乳铁蛋白的天然生物功能和 ICG 的高灵敏度 NIR 荧光特性,是研究乳铁蛋白分布、靶向递送以及荧光成像的理想工具。

二、分子结构与标记原理

ICG-Lactoferrin 的分子结构由三个关键模块组成:

吲哚菁绿(ICG)荧光模块

提供稳定的近红外荧光信号,可穿透组织深层,适用于体内与体外成像。

光稳定性优良,可在复杂生物体系中实现长时间追踪。

乳铁蛋白功能模块

乳铁蛋白具有高亲和力的铁结合位点和乳铁蛋白受体(LfR)结合位点。

可被多种细胞通过受体介导内吞,从而实现乳铁蛋白的靶向递送。

化学偶联连接模块

ICG 通过 NHS ester 或异硫氰酸酯基团与乳铁蛋白表面的赖氨酸残基形成稳定的酰胺键。

偶联过程中控制染料与蛋白摩尔比,以保证荧光信号和蛋白功能的平衡。

这种结构设计确保了 乳铁蛋白功能保留、荧光强度稳定,在活体和体外实验中均具有可靠示踪性能。

三、制备方法

ICG-Lactoferrin 的制备主要包括以下步骤:

1. ICG 活化

ICG 通过 NHS ester 或水溶性 ICG-Sulfo-NHS 转化为可反应中间体。

活化后的 ICG 能与乳铁蛋白的氨基形成共价键。

2. 偶联反应

在 PBS 或碳酸盐缓冲液(pH 7.4–8.5)中,将 ICG 活化物与乳铁蛋白混合。

ICG 与乳铁蛋白的赖氨酸氨基共价结合,形成稳定的 ICG-Lactoferrin。

反应需低温(4℃)并避光进行,以保持乳铁蛋白结构和荧光活性。

3. 纯化

采用透析、凝胶过滤或超滤去除未反应的 ICG。

得到高纯度的 ICG-Lactoferrin,保持蛋白分子完整。

4. 表征

紫外-可见光谱:ICG 特征吸收峰约 780 nm

荧光光谱:发射峰约 810–830 nm

SDS-PAGE:验证蛋白完整性

标记度测定(DOL):确定平均每个乳铁蛋白分子上偶联的 ICG 数量

通过表征,可保证 ICG-Lactoferrin 的荧光性能、蛋白功能和纯度达到实验标准。

四、理化性质

激发波长(Ex):约 780 nm

发射波长(Em):约 810–830 nm

外观:深绿色冻干粉末或溶液

溶解性:可溶于 PBS、Tris缓冲液及水性溶液

储存条件:−20℃ 避光

稳定性:在低温避光条件下荧光稳定,可长期储存

ICG-Lactoferrin 在水溶液和生物体系中均表现出良好的光稳定性和蛋白活性保持性。

五、产品特点

近红外荧光信号:适合活体成像和组织穿透检测,降低自体荧光干扰。

保留乳铁蛋白功能:受体结合能力及铁离子结合能力不受影响。

多用途应用:可用于细胞成像、受体介导内吞、血脑屏障递送及体内近红外成像。

高光稳定性:*光漂白,适合长时间观察和重复实验。

高纯度与低非特异性吸附:适用于体外及体内实验。

六、主要应用领域

1. 受体介导的细胞摄取研究

ICG-Lactoferrin 可用于研究乳铁蛋白受体(LfR)介导的内吞过程,分析细胞对乳铁蛋白的摄取和动力学。

2. 近红外体内成像

ICG 的 NIR 特性使其可用于小动物活体成像,研究乳铁蛋白在体内的分布、靶向性及血脑屏障穿透能力。

3. 药物递送与靶向研究

ICG-Lactoferrin 可作为模型蛋白评估乳铁蛋白修饰纳米颗粒或药物载体的递送效率。

可应用于脑靶向、肿瘤靶向及免疫递送系统开发。

4. 荧光定量与示踪

可用于乳铁蛋白在细胞或组织中的示踪、蛋白动力学分析及受体结合实验。

5. 生物材料研究

可用于材料表面对乳铁蛋白吸附行为及蛋白-材料相互作用的评估。

七、实验使用建议

避光操作:ICG 对光敏感,操作及储存需避光。

缓冲液选择:使用 PBS 或 Tris 缓冲液,避免含游离氨基或强还原剂的溶液。

温度控制:低温(4℃)操作可避免蛋白变性和荧光衰减。

浓度优化:根据实验目的调整工作浓度,确保荧光信号清晰且蛋白功能完整。

分装储存:冻干分装可延长寿命,避免反复冻融。

八、总结

ICG-Lactoferrin(吲哚菁绿标记乳铁蛋白) 是结合 乳铁蛋白天然功能与近红外荧光特性 的高性能荧光标记蛋白。通过 ICG 示踪,研究人员可在体外和体内观察乳铁蛋白的摄取、分布和转运,同时保留其生物活性。

凭借 近红外荧光、光稳定性强、高灵敏度及蛋白功能保留 等优势,ICG-Lactoferrin 广泛应用于 细胞成像、体内近红外成像、血脑屏障递送、纳米药物递送及生物材料研究。其可靠性和可视化特性,使其成为生命科学研究和生物医学开发中的重要实验工具,为乳铁蛋白及其衍生物的科学研究提供了有效支持。

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