FITC-Transferrin Fluorescein Isothiocyanate-Transferrin 荧光素标记转铁蛋白

产品名称：FITC-Transferrin Fluorescein Isothiocyanate-Transferrin 荧光素标记转铁蛋白

产品描述：

FITC-Transferrin Fluorescein Isothiocyanate-Transferrin 荧光素标记转铁蛋白

一、产品概述

FITC-Transferrin 是一种将 荧光素异硫氰酸酯（FITC, Fluorescein Isothiocyanate） 与 转铁蛋白（Transferrin, Tf） 共价偶联的高性能荧光标记蛋白。转铁蛋白是一种天然铁离子结合糖蛋白，主要存在于血浆中，负责体内铁离子的运输，并能被多种细胞表面转铁蛋白受体（TfR）识别，实现受体介导的内吞。

通过 FITC 标记，转铁蛋白获得了 明亮的绿色荧光信号（激发波长约 495 nm，发射波长约 520 nm），可直接用于 细胞成像、流式细胞术、受体结合研究、蛋白动力学分析及纳米递送系统追踪 等实验。FITC-Transferrin 结合了 天然蛋白功能与荧光可视化特性，为科研实验提供高灵敏度和高可视化的研究工具。

二、分子结构与标记原理

FITC-Transferrin 的分子结构主要由三个部分组成：

荧光模块（FITC）

FITC 是一种绿色荧光染料，激发波长 495 nm，发射波长 520 nm。

光稳定性良好，量子产率高，可提供明亮的绿色荧光信号。

蛋白模块（Transferrin）

转铁蛋白作为天然铁载体，具有高亲和力的铁结合位点和受体结合能力。

可被多种细胞通过 TfR 介导内吞，实现靶向递送和功能研究。

化学连接模块

FITC 通过异硫氰酸基团与转铁蛋白的赖氨酸氨基共价结合，形成稳定的硫代脲键。

偶联过程中控制染料与蛋白摩尔比，可保证荧光强度与蛋白功能兼顾。

这种结构设计确保了 FITC-Transferrin 荧光信号强烈、蛋白功能保留、结构稳定，可用于多种实验体系。

三、制备方法

FITC-Transferrin 的制备一般包括以下步骤：

1. 荧光染料活化

选用 FITC 异硫氰酸酯形式，使其可以与蛋白氨基共价结合。

活化后的 FITC 在缓冲液中可直接参与蛋白偶联反应。

2. 偶联反应

将 FITC 与转铁蛋白在碳酸盐缓冲液（pH 8.0–8.5）或 PBS 中混合。

异硫氰酸基团与转铁蛋白赖氨酸氨基反应，形成稳定硫代脲键。

反应需低温（4°C）并避光进行，以保持蛋白活性和荧光稳定性。

3. 纯化

采用透析、凝胶过滤或超滤去除未反应的 FITC。

得到高纯度 FITC-Transferrin，保持蛋白完整性和荧光特性。

4. 表征

紫外-可见光谱：确认 FITC 特征吸收峰（约 495 nm）

荧光光谱：发射峰约 520 nm

SDS-PAGE：检测蛋白完整性

标记度（DOL）：确定平均每个转铁蛋白分子上的 FITC 数量

通过这些表征方法，可确保 FITC-Transferrin 的荧光性能、蛋白活性及纯度达到实验标准。

四、理化性质

激发波长（Ex）：约 495 nm

发射波长（Em）：约 520 nm

外观：浅绿色冻干粉末或溶液

溶解性：可溶于 PBS、Tris 缓冲液及水性溶液

储存条件：−20℃ 避光保存

稳定性：低温避光条件下荧光和蛋白活性稳定

FITC-Transferrin 在水溶液中可长期储存，荧光信号稳定可靠，适合多种实验应用。

五、产品特点

绿色明亮荧光：FITC 提供清晰可视的绿色信号，适合细胞和组织观察。

保留蛋白功能：转铁蛋白的 TfR 结合能力和铁结合能力保持完整。

多用途应用：适用于流式细胞术、免疫荧光、细胞摄取研究及蛋白示踪。

光稳定性良好：在实验操作中*光漂白，可进行长时间成像。

高纯度与低非特异性吸附：保证实验信号可靠、特异性高。

六、主要应用领域

1. 受体介导内吞研究

FITC-Transferrin 可用于研究 TfR 介导的转铁蛋白摄取及动力学分析。

可在肿瘤细胞、脑内皮细胞和免疫细胞中追踪 Tf 进入细胞过程。

2. 细胞成像与共聚焦显微镜

可用于观察转铁蛋白在细胞内分布和运输轨迹。

FITC 的绿色荧光便于与其他荧光通道（如 Cy3、Cy5）联合成像。

3. 流式细胞术

用作荧光标记探针，定量分析细胞表面 TfR 表达水平。

可用于多色免疫分析，实现高通量细胞检测。

4. 蛋白动力学与示踪

适用于转铁蛋白吸收、运输及降解过程研究。

可用于评估蛋白质递送系统或纳米颗粒的靶向能力。

5. 生物医学研究

可作为靶向分子研究脑靶向递送、肿瘤靶向策略及免疫调控研究。

七、实验使用建议

避光操作：FITC 对光敏感，操作和储存需避光。

缓冲液选择：推荐 PBS 或 Tris，避免强还原剂或高浓度游离氨基。

温度控制：低温（4℃）可维持蛋白结构和荧光性能。

浓度优化：根据实验类型调整工作浓度，确保信号清晰且蛋白功能不受影响。

分装储存：冻干分装可延长产品寿命，避免反复冻融。

八、总结

FITC-Transferrin（荧光素异硫氰酸酯标记转铁蛋白） 是结合 转铁蛋白天然功能与绿色荧光可视化特性 的高性能标记蛋白。通过 FITC 的绿色荧光示踪，可在体外和体内研究转铁蛋白的摄取、分布及运输过程，同时保留蛋白本身的铁结合及受体结合功能。

凭借 明亮绿色荧光、高光稳定性、蛋白功能完整及多用途应用，FITC-Transferrin 广泛应用于 细胞成像、流式细胞术、受体介导内吞研究、蛋白动力学及纳米药物递送研究，为生命科学研究提供可靠、可视化的实验工具，助力科研和药物开发工作。

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