FITC-HSA 荧光素标记人血清白蛋白 FITC标记人血清白蛋白

文章来源 : 齐岳生物

作者:小编zyl

发布时间 : 2026-03-16 14:32:52

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产品名称:FITC-HSA 荧光素标记人血清白蛋白 FITC标记人血清白蛋白

产品描述:

FITC-HSA 荧光素标记人血清白蛋白 FITC标记人血清白蛋白

一、产品概述

FITC-HSA 是将 荧光素异硫氰酸酯(FITC, Fluorescein Isothiocyanate) 与 人血清白蛋白(Human Serum Albumin, HSA) 共价偶联的高性能荧光标记蛋白。HSA 是人体血浆中含量丰富的蛋白质,主要功能包括 维持血浆胶体渗透压、运输小分子药物及脂溶性物质、*氧化作用 等。

通过 FITC 标记,HSA 获得明亮的绿色荧光信号(激发波长约 495 nm,发射波长约 520 nm),在 细胞摄取研究、蛋白动力学分析、流式细胞术、药物载体示踪、纳米材料表征及组织成像 等实验中具有广泛应用。FITC-HSA 结合了 天然蛋白的生物功能与荧光可视化特性,为科研实验提供高灵敏度、可定量的研究工具。

二、分子结构与标记原理

FITC-HSA 分子结构主要包括三个部分:

荧光模块(FITC)

FITC 是一种绿色荧光染料,激发波长约 495 nm,发射波长约 520 nm。

光稳定性好、量子产率高,适合长期成像实验。

蛋白模块(HSA)

HSA 具有丰富的赖氨酸氨基和半胱氨酸巯基,可与小分子结合。

其天然生物功能使其在药物载体研究、蛋白动力学及血管递送研究中非常有用。

化学连接模块

FITC 通过异硫氰酸酯基团与 HSA 的赖氨酸氨基共价结合,形成稳定的硫代脲键。

偶联过程中可通过调节染料与蛋白摩尔比,确保荧光信号强度与蛋白功能兼顾。

这种设计保证了 FITC-HSA 荧光强、蛋白功能保持、结构稳定,适用于多种体外与体内实验。

三、制备方法

FITC-HSA 的制备一般包括以下步骤:

1. 荧光染料活化

选用 FITC 异硫氰酸酯形式,使其能够与蛋白氨基共价结合。

2. 偶联反应

在碳酸盐缓冲液(pH 8.0–8.5)或 PBS 中,将 FITC 与 HSA 混合。

异硫氰酸基团与 HSA 表面的赖氨酸氨基反应,形成稳定硫代脲键。

反应一般在低温(4℃)和避光条件下进行,以保持蛋白活性及荧光性能。

3. 纯化

使用透析、凝胶过滤或超滤去除未反应的 FITC。

得到高纯度的 FITC-HSA,确保蛋白完整性及荧光特性。

4. 表征

紫外-可见光谱:FITC 特征吸收峰约 495 nm

荧光光谱:发射峰约 520 nm

SDS-PAGE:检测蛋白完整性

标记度测定(DOL):确定每个 HSA 分子上平均偶联的 FITC 数量

通过这些分析方法,可确保 FITC-HSA 的荧光性能、蛋白活性及纯度达到实验标准。

四、理化性质

激发波长(Ex):约 495 nm

发射波长(Em):约 520 nm

外观:浅绿色冻干粉末或溶液

溶解性:可溶于 PBS、Tris 缓冲液及水性溶液

储存条件:−20℃ 避光

稳定性:在低温避光条件下荧光和蛋白活性稳定

FITC-HSA 在水溶液和生物体系中均表现出优良的稳定性,适用于多种实验环境。

五、产品特点

明亮绿色荧光:FITC 提供清晰可视信号,适合细胞及组织观察。

保留 HSA 功能:蛋白结构及结合能力保持完整。

广泛应用:适用于流式细胞术、免疫荧光、药物载体研究及蛋白示踪。

光稳定性好:*光漂白,适合长期实验和重复成像。

高纯度低非特异性吸附:确保实验信号可靠,特异性高。

六、主要应用领域

1. 药物载体与纳米递送研究

FITC-HSA 可作为模型蛋白用于纳米颗粒、蛋白载体和药物递送系统的示踪研究。

可评估蛋白在血浆中的稳定性及组织分布。

2. 细胞内蛋白摄取研究

可用于研究 HSA 通过受体介导的内吞及运输过程。

在肿瘤细胞、内皮细胞和免疫细胞中追踪 HSA 进入细胞的动力学。

3. 细胞成像与共聚焦显微镜

可观察蛋白在细胞内分布及亚细胞定位。

绿色荧光便于与其他荧光染料联合成像,实现多通道分析。

4. 流式细胞术

可作为荧光探针,定量分析蛋白摄取及细胞表面结合情况。

5. 蛋白动力学与示踪

可用于 HSA 在血液、细胞或组织中的分布及降解研究。

有助于评估蛋白-药物复合物或载体的靶向效率。

七、实验使用建议

避光操作:FITC 对光敏感,操作及储存需避光。

缓冲液选择:推荐 PBS 或 Tris,避免高浓度游离氨基或强还原剂。

温度控制:低温(4℃)操作可维持蛋白结构和荧光性能。

浓度优化:根据实验需求调整工作浓度,保证信号清晰且蛋白功能完整。

分装储存:冻干分装可延长使用寿命,避免反复冻融。

八、总结

FITC-HSA(荧光素标记人血清白蛋白) 是结合 HSA 天然功能与 FITC 绿色荧光特性 的高性能标记蛋白。通过 FITC 的可视化信号,可在体外和体内研究 HSA 的摄取、分布及运输,同时保留蛋白本身的结构和功能。

凭借 明亮绿色荧光、光稳定性强、蛋白功能完整及多用途应用,FITC-HSA 广泛用于 细胞成像、流式细胞术、受体介导内吞、蛋白动力学、药物载体及纳米递送研究,为生命科学研究和药物开发提供了可靠、可视化的实验工具。

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