RB-BSA Rhodamine B-BSA 罗丹明 B 标记牛血清白蛋白
文章来源 : 齐岳生物
作者:小编zyl
发布时间 : 2026-03-16 15:34:07
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产品名称:RB-BSA Rhodamine B-BSA 罗丹明 B 标记牛血清白蛋白
产品描述:
RB-BSA Rhodamine B-BSA 罗丹明 B 标记牛血清白蛋白
一、产品概述
RB-BSA 是将 罗丹明 B(Rhodamine B, RB) 荧光染料与 牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin, BSA) 共价偶联形成的高性能荧光蛋白。BSA 是分子量约 66 kDa 的血浆蛋白,具有 优良的水溶性、结构稳定性和生物相容性,广泛应用于 蛋白示踪、免疫检测、流式细胞术、共聚焦显微镜及生物材料研究。
RB 属于橙红色荧光染料,激发波长约 540–550 nm,发射波长约 570–580 nm,荧光亮度高、光稳定性好、量子产率高。通过与 BSA 偶联形成的 RB-BSA,兼具 蛋白的生物功能和 RB 的强荧光信号,可在多种科研实验中实现 蛋白示踪、内吞分析、免疫标记及荧光成像。
二、分子结构与标记原理
RB-BSA 分子主要由三个模块组成:
荧光模块(RB)
罗丹明 B 是橙红色荧光染料,激发波长约 540–550 nm,发射波长约 570–580 nm。
荧光亮度高、光稳定性好,适合多通道荧光成像和显微分析。
蛋白模块(BSA)
BSA 分子稳定、可溶于水,并具有多个赖氨酸氨基和疏水结合位点,可作为蛋白示踪和载体模型。
可用于免疫检测、蛋白内吞实验及纳米材料研究。
化学连接模块
RB 通常以 NHS ester 或类似活化形式与 BSA 的氨基共价偶联,形成稳定酰胺键。
偶联过程中可调节染料与蛋白摩尔比,以兼顾荧光强度和蛋白功能完整性。
这种共价偶联方式确保 RB-BSA 结构稳定、荧光亮度高、蛋白功能保留,适合多种体外和体内实验体系。
三、制备方法
RB-BSA 的制备步骤如下:
1. 荧光染料活化
将 Rhodamine B NHS ester 溶解于 PBS 或少量 DMSO 中,充分活化。
在避光条件下操作,保证染料反应活性。
2. 偶联反应
将 BSA 溶于 PBS 或碳酸盐缓冲液(pH 7.4–8.5),缓慢加入活化的 RB。
NHS ester 与 BSA 氨基形成稳定的酰胺键。
反应在低温(4℃)避光条件下进行,以保护蛋白结构和荧光性能。
3. 纯化
通过透析、凝胶过滤或超滤去除未结合的游离 RB。
获得高纯度、稳定的 RB-BSA 复合物。
4. 表征
紫外-可见光谱:RB 特征吸收峰约 550 nm
荧光光谱:发射峰约 570–580 nm
SDS-PAGE:检测蛋白完整性
标记度测定(DOL):计算每个 BSA 分子平均偶联的 RB 数量
表征确保 RB-BSA 的荧光性能和蛋白活性符合科研实验需求。
四、理化性质
激发波长(Ex):约 540–550 nm
发射波长(Em):约 570–580 nm
外观:橙红色冻干粉末或水溶液
溶解性:水溶性良好,可溶于 PBS、Tris 缓冲液及其他水性体系
储存条件:−20℃ 避光保存
稳定性:低温避光条件下荧光信号及蛋白活性稳定
RB-BSA 在体外实验中显示出高荧光亮度和优异的光稳定性,可用于高灵敏度检测和示踪实验。
五、产品特点
明亮橙红荧光:便于共聚焦显微镜、多通道成像及流式细胞分析。
蛋白功能完整:BSA 的天然结构保留完整,可作为示踪蛋白或载体使用。
多用途应用:蛋白示踪、免疫检测、流式分析、共聚焦成像及生物材料研究。
光稳定性好:*光漂白,适合长时间荧光实验。
水溶性优良:实验操作简便,无需有机溶剂即可溶解。
六、主要应用领域
1. 蛋白示踪与细胞摄取研究
RB-BSA 可用于观察细胞内蛋白摄取及运输路径,包括内体、溶酶体及细胞膜蛋白分布。
2. 共聚焦显微镜与荧光成像
橙红色荧光信号可与其他绿色或近红外染料联合,实现多通道成像。
3. 流式细胞术
可用于定量分析蛋白摄取效率、细胞内分布及动态变化。
4. 药物载体与纳米医学研究
BSA 作为药物载体模型,RB-BSA 可用于药物分布及内吞示踪。
5. 体外免疫分析与生物标记
可用于蛋白相互作用分析、免疫检测及荧光标记实验。
七、实验使用建议
避光操作:RB 对光敏感,操作和储存需避光。
缓冲液选择:推荐 PBS 或 Tris,避免强还原剂。
温度控制:低温操作(4℃)可保持蛋白结构和荧光性能。
浓度优化:根据实验需求调整工作浓度,确保荧光信号清晰。
分装储存:冻干或低温分装,避免反复冻融。
八、总结
RB-BSA(Rhodamine B 标记牛血清白蛋白) 将 BSA 的稳定性与罗丹明 B 的橙红荧光结合,形成水溶性、光稳定的荧光复合蛋白。通过荧光信号,可实现蛋白示踪、细胞内分布分析、免疫检测及药物载体示踪等科研应用。
凭借 荧光亮度高、蛋白功能完整、光稳定性强及多用途应用,RB-BSA 已成为 蛋白示踪、流式细胞术、共聚焦成像及生物材料研究中可靠、高灵敏的科研工具。
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