FITC-BSA Fluorescein Isothiocyanate-BSA 异硫氰酸荧光素标记牛血清白蛋白
文章来源 : 齐岳生物
作者:小编zyl
发布时间 : 2026-03-16 15:35:14
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产品名称:FITC-BSA Fluorescein Isothiocyanate-BSA 异硫氰酸荧光素标记牛血清白蛋白
产品描述:
FITC-BSA Fluorescein Isothiocyanate-BSA 异硫氰酸荧光素标记牛血清白蛋白
一、产品概述
FITC-BSA 是将 异硫氰酸荧光素(Fluorescein Isothiocyanate, FITC) 与 牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin, BSA) 共价偶联形成的高性能荧光标记蛋白。BSA 是分子量约 66 kDa 的血浆蛋白,具有 良好的水溶性、结构稳定性及生物相容性,在生物科研中广泛用于 蛋白示踪、免疫学实验、流式细胞术、共聚焦显微镜及药物载体研究。
FITC 属于绿色荧光染料,激发波长约 495 nm,发射波长约 519 nm,荧光亮度高、光稳定性好、量子产率高。通过与 BSA 偶联形成的 FITC-BSA,兼具 蛋白的生物功能性与 FITC 的荧光特性,可在体外和体内实验中实现 蛋白示踪、细胞内摄取分析、免疫标记及荧光成像。
二、分子结构与标记原理
FITC-BSA 分子主要由三个模块组成:
荧光模块(FITC)
FITC 为绿色荧光染料,激发波长约 495 nm,发射波长约 519 nm。
荧光亮度高、光稳定性好,可进行显微成像、流式细胞分析及多通道实验。
蛋白模块(BSA)
BSA 分子稳定、可溶于水,并具有多种氨基结合位点,可作为示踪蛋白或载体。
可用于蛋白示踪、免疫检测及纳米材料研究。
化学连接模块
FITC 通过异硫氰酸基(–N=C=S)与 BSA 的赖氨酸氨基共价结合,形成稳定的硫脲键。
偶联过程中可调节染料与蛋白摩尔比,以兼顾荧光强度和蛋白功能完整性。
这种共价偶联方式保证 FITC-BSA 结构稳定、荧光亮度高、蛋白功能保留,适用于多种科研实验。
三、制备方法
FITC-BSA 的制备通常包括以下步骤:
1. 荧光染料活化
将 FITC 溶解于缓冲液(如碳酸盐缓冲液,pH 9.0–9.5)或少量 DMSO。
在避光条件下操作,保证 FITC 活性和荧光性能。
2. 偶联反应
将 BSA 溶于 PBS 或碳酸盐缓冲液中,缓慢加入 FITC 溶液。
异硫氰酸基与 BSA 氨基形成稳定硫脲键,反应在低温(4℃)及避光条件下进行。
3. 纯化
通过透析、凝胶过滤或超滤去除未结合的游离 FITC。
获得高纯度、稳定的 FITC-BSA 蛋白复合物。
4. 表征
紫外-可见光谱:FITC 特征吸收峰约 495 nm
荧光光谱:发射峰约 519 nm
SDS-PAGE:检测蛋白完整性
标记度测定(DOL):计算每个 BSA 分子平均偶联的 FITC 数量
表征确保 FITC-BSA 的荧光性能和蛋白活性满足科研实验要求。
四、理化性质
激发波长(Ex):约 495 nm
发射波长(Em):约 519 nm
外观:浅绿色冻干粉末或水溶液
溶解性:水溶性良好,可溶于 PBS、Tris 缓冲液及其他水性体系
储存条件:−20℃ 避光保存
稳定性:低温避光条件下荧光信号及蛋白活性稳定
FITC-BSA 在体外实验体系中表现出高荧光亮度和优异的光稳定性,适合长时间观察和定量分析。
五、产品特点
明亮绿色荧光:适合共聚焦显微镜、多通道成像及流式细胞分析。
蛋白功能完整:BSA 的天然结构和功能保留,可作为示踪蛋白或载体使用。
多用途应用:蛋白示踪、免疫检测、流式分析、共聚焦成像及药物载体示踪。
光稳定性好:*光漂白,适合长时间荧光实验。
水溶性优良:实验操作简便,无需有机溶剂即可溶解。
六、主要应用领域
1. 蛋白示踪与细胞摄取研究
FITC-BSA 可用于观察细胞内蛋白摄取及运输路径,包括内体、溶酶体及细胞膜蛋白分布。
2. 共聚焦显微镜与荧光成像
绿色荧光信号可与其他红色或近红外染料联合使用,实现多通道成像。
3. 流式细胞术
可用于定量分析蛋白摄取效率、细胞内分布及动态变化。
4. 药物载体与纳米医学研究
BSA 作为蛋白载体模型,FITC-BSA 可用于药物分布及内吞示踪。
5. 体外免疫分析与生物标记
可用于蛋白相互作用分析、免疫检测及荧光标记实验。
七、实验使用建议
避光操作:FITC 对光敏感,操作和储存需避光。
缓冲液选择:推荐 PBS 或 Tris,避免强还原剂。
温度控制:低温(4℃)操作可保持蛋白结构和荧光性能。
浓度优化:根据实验需求调整工作浓度,确保荧光信号清晰。
分装储存:冻干或低温分装,避免反复冻融。
八、总结
FITC-BSA(异硫氰酸荧光素标记牛血清白蛋白) 将 BSA 的生物相容性与稳定性与 FITC 的绿色荧光特性完美结合,形成水溶性、光稳定的荧光复合蛋白。通过荧光信号,可实现蛋白示踪、细胞内分布分析、免疫检测及药物载体示踪等科研应用。
凭借 荧光亮度高、蛋白功能完整、光稳定性强及多用途应用,FITC-BSA 已成为 蛋白示踪、流式细胞术、共聚焦成像及生物材料研究中可靠、高灵敏的科研工具。
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