FITC-BSA Fluorescein Isothiocyanate-BSA 异硫氰酸荧光素标记牛血清白蛋白

文章来源 : 齐岳生物

作者:小编zyl

发布时间 : 2026-03-16 15:35:14

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产品名称:FITC-BSA Fluorescein Isothiocyanate-BSA 异硫氰酸荧光素标记牛血清白蛋白

产品描述:

FITC-BSA Fluorescein Isothiocyanate-BSA 异硫氰酸荧光素标记牛血清白蛋白

一、产品概述

FITC-BSA 是将 异硫氰酸荧光素(Fluorescein Isothiocyanate, FITC) 与 牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin, BSA) 共价偶联形成的高性能荧光标记蛋白。BSA 是分子量约 66 kDa 的血浆蛋白,具有 良好的水溶性、结构稳定性及生物相容性,在生物科研中广泛用于 蛋白示踪、免疫学实验、流式细胞术、共聚焦显微镜及药物载体研究。

FITC 属于绿色荧光染料,激发波长约 495 nm,发射波长约 519 nm,荧光亮度高、光稳定性好、量子产率高。通过与 BSA 偶联形成的 FITC-BSA,兼具 蛋白的生物功能性与 FITC 的荧光特性,可在体外和体内实验中实现 蛋白示踪、细胞内摄取分析、免疫标记及荧光成像。

二、分子结构与标记原理

FITC-BSA 分子主要由三个模块组成:

荧光模块(FITC)

FITC 为绿色荧光染料,激发波长约 495 nm,发射波长约 519 nm。

荧光亮度高、光稳定性好,可进行显微成像、流式细胞分析及多通道实验。

蛋白模块(BSA)

BSA 分子稳定、可溶于水,并具有多种氨基结合位点,可作为示踪蛋白或载体。

可用于蛋白示踪、免疫检测及纳米材料研究。

化学连接模块

FITC 通过异硫氰酸基(–N=C=S)与 BSA 的赖氨酸氨基共价结合,形成稳定的硫脲键。

偶联过程中可调节染料与蛋白摩尔比,以兼顾荧光强度和蛋白功能完整性。

这种共价偶联方式保证 FITC-BSA 结构稳定、荧光亮度高、蛋白功能保留,适用于多种科研实验。

三、制备方法

FITC-BSA 的制备通常包括以下步骤:

1. 荧光染料活化

将 FITC 溶解于缓冲液(如碳酸盐缓冲液,pH 9.0–9.5)或少量 DMSO。

在避光条件下操作,保证 FITC 活性和荧光性能。

2. 偶联反应

将 BSA 溶于 PBS 或碳酸盐缓冲液中,缓慢加入 FITC 溶液。

异硫氰酸基与 BSA 氨基形成稳定硫脲键,反应在低温(4℃)及避光条件下进行。

3. 纯化

通过透析、凝胶过滤或超滤去除未结合的游离 FITC。

获得高纯度、稳定的 FITC-BSA 蛋白复合物。

4. 表征

紫外-可见光谱:FITC 特征吸收峰约 495 nm

荧光光谱:发射峰约 519 nm

SDS-PAGE:检测蛋白完整性

标记度测定(DOL):计算每个 BSA 分子平均偶联的 FITC 数量

表征确保 FITC-BSA 的荧光性能和蛋白活性满足科研实验要求。

四、理化性质

激发波长(Ex):约 495 nm

发射波长(Em):约 519 nm

外观:浅绿色冻干粉末或水溶液

溶解性:水溶性良好,可溶于 PBS、Tris 缓冲液及其他水性体系

储存条件:−20℃ 避光保存

稳定性:低温避光条件下荧光信号及蛋白活性稳定

FITC-BSA 在体外实验体系中表现出高荧光亮度和优异的光稳定性,适合长时间观察和定量分析。

五、产品特点

明亮绿色荧光:适合共聚焦显微镜、多通道成像及流式细胞分析。

蛋白功能完整:BSA 的天然结构和功能保留,可作为示踪蛋白或载体使用。

多用途应用:蛋白示踪、免疫检测、流式分析、共聚焦成像及药物载体示踪。

光稳定性好:*光漂白,适合长时间荧光实验。

水溶性优良:实验操作简便,无需有机溶剂即可溶解。

六、主要应用领域

1. 蛋白示踪与细胞摄取研究

FITC-BSA 可用于观察细胞内蛋白摄取及运输路径,包括内体、溶酶体及细胞膜蛋白分布。

2. 共聚焦显微镜与荧光成像

绿色荧光信号可与其他红色或近红外染料联合使用,实现多通道成像。

3. 流式细胞术

可用于定量分析蛋白摄取效率、细胞内分布及动态变化。

4. 药物载体与纳米医学研究

BSA 作为蛋白载体模型,FITC-BSA 可用于药物分布及内吞示踪。

5. 体外免疫分析与生物标记

可用于蛋白相互作用分析、免疫检测及荧光标记实验。

七、实验使用建议

避光操作:FITC 对光敏感,操作和储存需避光。

缓冲液选择:推荐 PBS 或 Tris,避免强还原剂。

温度控制:低温(4℃)操作可保持蛋白结构和荧光性能。

浓度优化:根据实验需求调整工作浓度,确保荧光信号清晰。

分装储存:冻干或低温分装,避免反复冻融。

八、总结

FITC-BSA(异硫氰酸荧光素标记牛血清白蛋白) 将 BSA 的生物相容性与稳定性与 FITC 的绿色荧光特性完美结合,形成水溶性、光稳定的荧光复合蛋白。通过荧光信号,可实现蛋白示踪、细胞内分布分析、免疫检测及药物载体示踪等科研应用。

凭借 荧光亮度高、蛋白功能完整、光稳定性强及多用途应用,FITC-BSA 已成为 蛋白示踪、流式细胞术、共聚焦成像及生物材料研究中可靠、高灵敏的科研工具。

西安齐岳生物科技有限公司提供专业的荧光标记服务与定制解决方案,致力于满足科研与应用领域对高性能荧光标记产品的需求。公司可针对蛋白质、肽、多糖、小分子化合物以及纳米材料进行高效、稳定的荧光修饰,涵盖从可见光到近红外 NIR)范围的多种荧光染料,如FITC、Cy3、Cy5、Cy5.5及Cy7等。

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