CY5-BSA Cyanine5-BSA 荧光素CY5标记牛血清白蛋白

产品名称：CY5-BSA Cyanine5-BSA 荧光素CY5标记牛血清白蛋白

产品描述：

CY5-BSA Cyanine5-BSA 荧光素CY5标记牛血清白蛋白

一、产品概述

CY5-BSA 是将 近红外荧光染料 Cyanine5（CY5） 与 牛血清白蛋白（Bovine Serum Albumin, BSA） 共价偶联制备的高性能荧光标记蛋白。BSA 是分子量约 66 kDa 的血浆蛋白，具有 优良的水溶性、结构稳定性和生物相容性，在生物科研中广泛用于 蛋白示踪、免疫学实验、体外和体内成像研究。

CY5 属于 Cyanine 系列染料，具有 激发波长约 650 nm、发射波长约 670 nm 的近红外荧光特性，亮度高、光稳定性好、量子产率高。通过与 BSA 偶联形成的 CY5-BSA，兼具 蛋白的生物功能性和 CY5 的荧光信号特性，可用于 蛋白追踪、细胞内示踪、流式细胞术、共聚焦显微成像及生物材料研究，为科研实验提供高灵敏度、低背景的可视化工具。

二、分子结构与标记原理

CY5-BSA 分子主要由三个模块组成：

荧光模块（CY5）

CY5 是近红外荧光染料，激发波长约 650 nm，发射波长约 670 nm。

具有高亮度、光稳定性好，适合多通道荧光成像及体内荧光检测。

蛋白模块（BSA）

BSA 分子稳定、可溶于水，并具有多种氨基结合位点，可作为模型蛋白或载体。

可用于蛋白示踪、免疫反应及药物载体示踪研究。

化学连接模块

CY5 通常以 NHS ester 或 Sulfo-NHS ester 形式与 BSA 的赖氨酸氨基共价偶联，形成稳定的酰胺键。

偶联过程中可调节染料与蛋白摩尔比，以兼顾荧光强度与蛋白活性。

通过共价偶联方式，CY5-BSA 保持蛋白结构完整、荧光信号明亮且稳定，适用于多种体外和体内实验体系。

三、制备方法

CY5-BSA 的制备主要包括以下步骤：

1. 荧光染料活化

CY5 以 NHS ester 或 Sulfo-NHS ester 形式溶解于 PBS 或少量 DMSO。

在避光条件下准备，保证染料充分活化。

2. 偶联反应

将 BSA 溶于 PBS 或碳酸盐缓冲液（pH 7.4–8.5），缓慢加入活化的 CY5。

NHS ester 与 BSA 氨基形成稳定酰胺键，反应在低温（4℃）避光条件下进行，以保护蛋白结构和荧光性能。

3. 纯化

可通过透析、凝胶过滤或超滤去除未结合的游离 CY5。

获得高纯度、稳定的 CY5-BSA 蛋白复合物。

4. 表征

紫外-可见光谱：CY5 特征吸收峰约 650 nm

荧光光谱：发射峰约 670 nm

SDS-PAGE：检测蛋白完整性

标记度测定（DOL）：计算每个 BSA 分子平均偶联的 CY5 数量

通过这些表征方法，可确保 CY5-BSA 的荧光性能和蛋白活性满足科研实验需求。

四、理化性质

激发波长（Ex）：约 650 nm

发射波长（Em）：约 670 nm

外观：深蓝色或紫红色冻干粉末/水溶液

溶解性：水溶性良好，可溶于 PBS、Tris 缓冲液及其他水性体系

储存条件：−20℃ 避光保存

稳定性：低温避光条件下荧光信号及蛋白活性稳定

CY5-BSA 在体外实验体系中表现出优异的荧光稳定性和高可检测性，可满足高灵敏科研实验需求。

五、产品特点

近红外荧光信号：适合多通道共聚焦显微镜、体外成像及流式分析。

蛋白功能完整：BSA 的天然结构和功能保留，可用于示踪或作为载体。

高水溶性：适合水体系操作，操作简便。

光稳定性强：*光漂白，适合长时间成像实验。

多用途应用：蛋白示踪、流式细胞术、免疫检测、体外/体内成像及药物载体示踪。

六、主要应用领域

1. 蛋白示踪与细胞摄取研究

CY5-BSA 可用于分析细胞内蛋白摄取和运输路径，观察内体及溶酶体分布。

2. 共聚焦显微镜与荧光成像

近红外荧光信号可与其他绿色或橙红色荧光染料联合使用，实现多通道成像。

3. 流式细胞术

可用于定量分析蛋白摄取效率、细胞内分布及动态变化。

4. 药物载体与纳米医学研究

BSA 作为药物模型载体，CY5-BSA 可用于药物分布及内吞示踪研究。

5. 体外免疫分析与生物标记

可用于蛋白相互作用分析、免疫学检测及荧光标记实验。

七、实验使用建议

避光操作：CY5 对光敏感，操作和储存需避光。

缓冲液选择：推荐 PBS 或 Tris，避免强还原剂。

温度控制：低温（4℃）操作可保持蛋白结构和荧光性能。

浓度优化：根据实验需求调整工作浓度，确保荧光信号清晰且蛋白功能完整。

分装储存：冻干或低温分装，避免反复冻融。

八、总结

CY5-BSA（Cyanine5 标记牛血清白蛋白） 将 BSA 的生物相容性和稳定性与 CY5 的近红外荧光特性完美结合，形成水溶性、光稳定的荧光复合蛋白。通过近红外荧光信号，可用于蛋白示踪、细胞内分布分析、免疫检测及药物载体示踪等多种科研应用。

凭借 荧光亮度高、蛋白功能完整、光稳定性强及多用途应用，CY5-BSA 已成为 蛋白示踪、流式细胞术、共聚焦成像及生物材料研究中可靠、高灵敏的科研工具。

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