FITC-OVA 异硫氰酸荧光素标记卵清蛋白 Ovalbumin-FITC

产品名称：FITC-OVA 异硫氰酸荧光素标记卵清蛋白 Ovalbumin-FITC

产品描述：

FITC-OVA 异硫氰酸荧光素标记卵清蛋白 Ovalbumin-FITC 

一、产品概述

FITC-OVA 是将 绿色荧光染料异硫氰酸荧光素（FITC, Fluorescein Isothiocyanate） 与 卵清蛋白（Ovalbumin, OVA） 共价偶联而制备的荧光标记蛋白。OVA 是一种来源于鸡蛋清的主要蛋白质，分子量约 45 kDa，具有 良好的水溶性、稳定性及免疫原性，广泛用于 免疫学研究、*原示踪及疫苗模型实验。

通过 FITC 标记，OVA 获得 明亮绿色荧光信号（激发波长约 495 nm，发射波长约 520 nm），可在 细胞成像、流式细胞术、免疫反应示踪及*原动力学研究中实现可视化。FITC-OVA 结合了 OVA 的天然免疫原性与 FITC 的高亮绿色荧光特性，为生命科学实验提供直观可靠的工具。

二、分子结构与标记原理

FITC-OVA 分子结构由三个主要部分组成：

荧光模块（FITC）

FITC 是绿色荧光染料，激发波长约 495 nm，发射波长约 520 nm。

荧光亮度高、量子产率大，光稳定性好，可进行长时间观察和定量分析。

蛋白模块（OVA）

Ovalbumin 具有良好的溶解性和稳定性，同时保留免疫原性，适合用于*原示踪和免疫学研究。

可被*原递呈细胞识别和处理，参与免疫反应分析。

化学连接模块

FITC 通过异硫氰酸基与 OVA 的赖氨酸氨基共价偶联，形成稳定的硫代脲键。

偶联过程中可调节染料与蛋白摩尔比，保证荧光强度和蛋白功能兼顾。

该设计确保 FITC-OVA 荧光明亮、蛋白活性保留、结构稳定，适用于多种体外与体内实验体系。

三、制备方法

FITC-OVA 的制备一般包括以下步骤：

1. 荧光染料活化

使用 FITC 异硫氰酸酯形式，使其能够与蛋白赖氨酸氨基共价结合。

2. 偶联反应

在碳酸盐缓冲液或 PBS（pH 8.0–8.5）中，将 FITC 与 OVA 混合。

异硫氰酸基与 OVA 氨基形成稳定的硫代脲键。

反应在低温（4℃）及避光条件下进行，以保持蛋白结构和荧光性能。

3. 纯化

采用透析、凝胶过滤或超滤去除未反应的 FITC。

得到高纯度 FITC-OVA，保持蛋白完整性及荧光特性。

4. 表征

紫外-可见光谱：FITC 特征吸收峰约 495 nm

荧光光谱：发射峰约 520 nm

SDS-PAGE：检测蛋白完整性

标记度测定（DOL）：计算每个 OVA 分子偶联的 FITC 数量

通过表征方法，可确保 FITC-OVA 的荧光性能和蛋白活性达到科研实验标准。

四、理化性质

激发波长（Ex）：约 495 nm

发射波长（Em）：约 520 nm

外观：浅绿色冻干粉末或溶液

溶解性：可溶于 PBS、Tris 缓冲液及水性溶液

储存条件：−20℃ 避光保存

稳定性：低温避光条件下荧光和蛋白功能稳定

FITC-OVA 在水溶液和生物体系中表现出优良的稳定性，适用于多种实验条件。

五、产品特点

明亮绿色荧光：便于细胞及组织观察，可与红色或近红外荧光染料联合成像。

保留免疫原性：OVA 的天然*原特性完整，可被*原递呈细胞识别。

多用途应用：适用于细胞成像、流式细胞术、免疫反应示踪及*原动力学研究。

光稳定性好：*光漂白，可进行长时间成像实验。

高纯度低非特异性吸附：实验信号可靠、特异性高。

六、主要应用领域

1. *原递呈和免疫研究

FITC-OVA 可用于监测*原在细胞内的摄取和处理过程。

用于研究*原递呈细胞（APC）的吞噬与*原加工机制。

2. 细胞成像与共聚焦显微镜

可直接观察 OVA 在细胞膜、内体及溶酶体中的分布。

与其他荧光通道组合，可进行多通道成像分析。

3. 流式细胞术

可用于定量分析*原摄取效率、内吞动力学及细胞免疫状态。

4. 疫苗与免疫反应研究

可用于模拟*原在体内的分布及免疫反应动力学研究。

5. 荧光示踪与动力学研究

可用于分析蛋白质在体外体系中的运输、内吞及代谢过程。

七、实验使用建议

避光操作：FITC 对光敏感，实验操作和储存需避光。

缓冲液选择：推荐 PBS 或 Tris，避免强还原剂或高浓度游离氨基。

温度控制：低温（4℃）操作可保持蛋白结构及荧光性能。

浓度优化：根据实验需求调整工作浓度，保证信号清晰且蛋白功能完整。

分装储存：冻干分装可延长使用寿命，避免反复冻融。

八、总结

FITC-OVA（异硫氰酸荧光素标记卵清蛋白） 是结合 OVA 天然免疫原性与 FITC 明亮绿色荧光特性 的高性能标记蛋白。通过绿色荧光信号，可在体外研究*原摄取、细胞内分布及免疫反应动力学，同时保持蛋白的天然功能。

凭借 明亮绿色荧光、免疫原性完整、光稳定性好及多用途应用，FITC-OVA 广泛应用于 细胞成像、流式细胞术、*原示踪、免疫动力学及疫苗模型研究，为生命科学和免疫学实验提供可靠、可视化的科研工具。

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