CY5.5-OVA Cyanine5.5-Ovalbumin 花菁染料 CY5.5 标记卵清蛋白
文章来源 : 齐岳生物
作者:小编zyl
发布时间 : 2026-03-16 14:55:47
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产品名称:CY5.5-OVA Cyanine5.5-Ovalbumin 花菁染料 CY5.5 标记卵清蛋白
产品描述:
CY5.5-OVA Cyanine5.5-Ovalbumin 花菁染料 CY5.5 标记卵清蛋白
一、产品概述
CY5.5-OVA 是将 近红外荧光染料 Cyanine5.5(CY5.5) 与 卵清蛋白(Ovalbumin, OVA) 共价偶联制备的高性能荧光标记蛋白。OVA 是来源于鸡蛋清的主要蛋白质,分子量约 45 kDa,具有 良好的水溶性、热稳定性以及免疫原性,广泛应用于 免疫学研究、*原示踪及疫苗模型实验。
通过 CY5.5 标记,OVA 获得 明亮的红外荧光信号(激发波长约 675 nm,发射波长约 694 nm),可用于 流式细胞术、共聚焦显微镜、多通道成像及*原内吞动力学研究。CY5.5-OVA 将 OVA 的天然免疫原性与 CY5.5 的高灵敏度红外荧光特性结合,为生命科学研究提供高灵敏、可视化的实验工具。
二、分子结构与标记原理
CY5.5-OVA 分子结构主要由三个部分组成:
荧光模块(CY5.5)
CY5.5 是近红外荧光染料,激发波长约 675 nm,发射波长约 694 nm。
光稳定性高、量子产率大,可进行长时间成像及体外/体内实验。
蛋白模块(OVA)
Ovalbumin 分子稳定、溶解性好,并保持完整免疫原性。
可被*原递呈细胞识别,用于*原摄取及免疫反应分析。
化学连接模块
CY5.5 通常通过 NHS ester 或 Sulfo-NHS ester 与 OVA 的赖氨酸氨基共价结合,形成稳定酰胺键。
可根据实验需求调节染料与蛋白摩尔比,保证荧光强度与蛋白功能兼顾。
这种设计确保 CY5.5-OVA 荧光明亮、蛋白功能保留、结构稳定,适合多种体外及体内研究体系。
三、制备方法
CY5.5-OVA 的制备一般包括以下步骤:
1. 荧光染料活化
使用 CY5.5 的 NHS ester 或 Sulfo-NHS ester 形式,使其能够与 OVA 的赖氨酸氨基共价结合。
2. 偶联反应
在 PBS 或碳酸盐缓冲液(pH 7.4–8.5)中,将活化的 CY5.5 与 OVA 混合。
NHS 酯与 OVA 氨基反应生成稳定的酰胺键。
反应在低温(4℃)及避光条件下进行,以保持蛋白结构和荧光性能。
3. 纯化
采用透析、凝胶过滤或超滤去除未结合的 CY5.5。
得到高纯度 CY5.5-OVA,保持蛋白完整性和荧光特性。
4. 表征
紫外-可见光谱:CY5.5 特征吸收峰约 675 nm
荧光光谱:发射峰约 694 nm
SDS-PAGE:检测蛋白完整性
标记度测定(DOL):确定每个 OVA 分子平均偶联的 CY5.5 数量
通过表征方法,可确保 CY5.5-OVA 的荧光性能和蛋白活性满足科研标准。
四、理化性质
激发波长(Ex):约 675 nm
发射波长(Em):约 694 nm
外观:深红色冻干粉末或溶液
溶解性:可溶于 PBS、Tris 缓冲液及水性溶液
储存条件:−20℃ 避光
稳定性:低温避光条件下荧光和蛋白活性稳定
CY5.5-OVA 在水溶液和生物体系中均具有优异稳定性,适用于体外和体内多种实验条件。
五、产品特点
明亮红外荧光:便于多通道成像及体外/体内观察,适合与绿色或黄色荧光染料组合。
保留*原特性:OVA 的天然免疫原性完整,可被*原递呈细胞识别。
多用途应用:适用于流式细胞术、共聚焦显微镜、多通道成像及*原动力学研究。
光稳定性强:*光漂白,可进行长时间成像实验。
高纯度低非特异性吸附:实验信号可靠、特异性高。
六、主要应用领域
1. *原递呈与免疫学研究
CY5.5-OVA 可用于监测*原在细胞内摄取、加工和递呈过程。
用于分析*原递呈细胞(APC)的吞噬、内体运输及溶酶体处理机制。
2. 细胞成像与共聚焦显微镜
可观察 OVA 在细胞膜、内体及溶酶体中的分布。
红外荧光可与绿色、黄色染料联合进行多通道成像分析。
3. 流式细胞术
可用于定量分析*原摄取效率、内吞动力学及细胞免疫状态。
4. 疫苗模型与免疫反应研究
用于模拟*原在体内分布及免疫反应动力学。
5. 荧光示踪与蛋白动力学研究
可用于分析 OVA 在体外或体内体系中的运输、内吞及代谢过程。
七、实验使用建议
避光操作:CY5.5 对光敏感,实验操作及储存需避光。
缓冲液选择:推荐 PBS 或 Tris,避免强还原剂或高浓度游离氨基。
温度控制:低温(4℃)操作可保持蛋白结构及荧光性能。
浓度优化:根据实验需求调整工作浓度,保证信号清晰且蛋白功能完整。
分装储存:冻干分装可延长使用寿命,避免反复冻融。
八、总结
CY5.5-OVA(花菁染料 CY5.5 标记卵清蛋白) 是结合 OVA 天然免疫原性与 CY5.5 高灵敏度红外荧光特性 的高性能标记蛋白。通过红外荧光信号,可在体外研究*原摄取、内吞及免疫反应动力学,同时保持蛋白天然功能。
凭借 明亮红外荧光、免疫原性完整、光稳定性好及多用途应用,CY5.5-OVA 广泛应用于 流式细胞术、共聚焦显微镜、多通道成像、*原示踪及疫苗免疫研究,为生命科学和免疫学实验提供可靠、可视化的科研工具。
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