RhodamineB-PEG-Transferrin RB-PEG-Transferrin 罗丹明B-聚乙二醇-转铁蛋白

产品名称：RhodamineB-PEG-Transferrin RB-PEG-Transferrin 罗丹明B-聚乙二醇-转铁蛋白

产品描述：

RhodamineB-PEG-Transferrin RB-PEG-Transferrin 罗丹明B-聚乙二醇-转铁蛋白

一、产品概述

RhodamineB-PEG-Transferrin（RB-PEG-Transferrin） 是一种将 罗丹明B（Rhodamine B）荧光染料 通过 聚乙二醇（PEG） 连接并共价偶联到 转铁蛋白（Transferrin, Tf） 的多功能荧光标记蛋白。转铁蛋白是一种天然铁结合蛋白，广泛存在于血浆中，主要功能是 运送铁离子至组织与细胞。通过将荧光染料与转铁蛋白结合，RB-PEG-Transferrin 能够在保持蛋白生物活性的同时提供稳定的 橙红色荧光信号，适用于 细胞摄取研究、受体介导的内吞研究、靶向药物递送以及生物成像 等应用。

罗丹明B是一种广泛使用的荧光染料，其激发波长约为 540–560 nm，发射波长约为 570–590 nm，光稳定性好，量子产率高，能够在复杂生物体系中提供明亮且可追踪的荧光信号。通过 PEG 的引入，不仅可以增加蛋白分子的水溶性和生物稳定性，还能降低荧光染料对蛋白构象的干扰，确保转铁蛋白的受体结合能力不受影响。

RB-PEG-Transferrin 因其高特异性和可视化能力，成为生命科学和药物研发领域中 靶向研究和纳米递送系统设计的重要工具。

二、分子结构与设计原理

RB-PEG-Transferrin 的结构主要由三个功能模块组成：

罗丹明B荧光模块

提供明亮稳定的橙红色荧光信号，适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜和流式细胞仪等检测平台。

PEG连接模块

PEG 分子作为柔性连接臂，增加整体水溶性，改善蛋白在溶液中的稳定性，同时降低染料对蛋白活性的空间干扰。

转铁蛋白功能模块

转铁蛋白是一种天然铁结合蛋白，含有高亲和力的铁结合位点和受体结合位点，可通过受体介导被细胞摄取。

设计原理基于 PEG作为缓冲连接臂，将荧光染料与蛋白之间保持合理距离，从而 兼顾荧光性能和蛋白功能性。这种结构使 RB-PEG-Transferrin 能在不影响 Tf 受体结合活性的前提下，实现可视化追踪。

三、制备方法

RB-PEG-Transferrin 的合成通常分为三步：

1. 罗丹明B活化

罗丹明B通过活化形成 RhodamineB-NHS ester 或 RhodamineB-COOH，以提供反应活性位点，用于与 PEG 分子末端的氨基或羟基结合。

2. RB-PEG中间体形成

活化的罗丹明B与 NH₂-PEG-NHS 或 MAL-PEG-NH₂ 在适当溶剂（如 DMF、DMSO）中反应生成 RB-PEG 中间体。

在此过程中需避光操作，以防荧光染料光降解。

3. RB-PEG与转铁蛋白偶联

将 RB-PEG 中间体加入转铁蛋白溶液中，在缓冲液条件下（如 PBS 或碳酸盐缓冲液，pH 7.4–8.5）进行偶联。

PEG 末端的活性基团可与转铁蛋白表面的 赖氨酸残基氨基或巯基 形成共价键，生成 RB-PEG-Transferrin。

4. 纯化与表征

透析或凝胶过滤层析：去除未反应的染料和小分子杂质。

SDS-PAGE、电泳分析：确认蛋白分子完整性。

紫外-可见和荧光光谱：验证荧光标记成功及标记度（DOL, Degree of Labeling）。

通过这些方法可确保 RB-PEG-Transferrin 高纯度、功能性和荧光性能稳定。

四、理化性质

激发波长（Ex）：540–560 nm

发射波长（Em）：570–590 nm

外观：橙红色冻干粉末

溶解性：可溶于 PBS、Tris缓冲液等水溶液

储存条件：−20℃，避光保存

稳定性：避免反复冻融和强光照射

RB-PEG-Transferrin 在水溶液中稳定，荧光信号强且持续时间长，适合长期实验使用。

五、产品特点

强荧光信号：罗丹明B量子产率高，提供明亮可追踪信号。

PEG提升稳定性：PEG缓冲连接降低蛋白聚集，提高水溶性和生物稳定性。

保留蛋白功能：PEG间隔设计确保转铁蛋白的受体结合能力不受影响。

适用多种荧光平台：可在荧光显微镜、共聚焦显微镜、流式细胞仪等平台检测。

多功能研究工具：既可用于蛋白追踪，也可作为药物递送系统的靶向载体模型。

六、主要应用领域

1. 受体介导的细胞摄取研究

转铁蛋白可以通过 Tf受体介导内吞 被多种细胞摄取，RB-PEG-Transferrin 可用于追踪该过程，评估受体表达水平及内吞动力学。

2. 药物递送与纳米载体研究

RB-PEG-Transferrin 可作为 靶向蛋白模型，研究药物或纳米颗粒在细胞中的摄取和定位，为靶向药物设计提供实验依据。

3. 细胞成像与共聚焦显微镜研究

通过橙红色荧光信号，可直观观察转铁蛋白在细胞或组织中的分布，实现活体或体外成像。

4. 生物材料蛋白吸附研究

用于评估材料表面对蛋白的吸附行为，特别是在生物医学材料和器械表面研究中。

5. 荧光标记实验和定量分析

RB-PEG-Transferrin 可用于细胞内外蛋白定位定量实验，或作为荧光对照和校正标准。

七、实验使用建议

避光操作：操作和储存需避光，以保证荧光稳定性。

缓冲液选择：建议使用 PBS 或 Tris 缓冲液，避免含游离氨基的缓冲液影响标记稳定性。

分装保存：冻干分装可提高长期稳定性。

温度控制：实验时根据细胞或蛋白体系选择适宜温度。

优化实验浓度：根据实验需求调节工作浓度，确保信号可检测且蛋白活性不受影响。

八、总结

RhodamineB-PEG-Transferrin 是一种结合 荧光染料、PEG及转铁蛋白 的多功能荧光标记蛋白。通过 PEG 缓冲连接，保证了荧光性能和蛋白活性的平衡。其亮丽橙红色荧光信号、高生物稳定性和保留的受体结合能力，使其成为 细胞成像、受体介导摄取研究、靶向递送系统评估以及生物材料研究 的理想工具。

凭借高特异性和可靠性，RB-PEG-Transferrin 已成为 生命科学研究和纳米医学开发中不可或缺的荧光标记工具，能够直观、高效地辅助科学家观察蛋白行为和分子相互作用。

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