怎样用荧光染料标记蛋白?FITC标记的操作步骤

文章来源 : 齐岳生物

作者:zhn

发布时间 : 2022-08-23 12:41:44

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产品名称:怎样用荧光染料标记蛋白?FITC标记的操作步骤

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怎样用荧光染料标记蛋白?FITC标记的操作步骤荧光染料蛋白体外标记荧光染料标记蛋白或多肽是常见的蛋白体外标记,除了GFP等融合表达荧光蛋白之外,目标蛋白经过荧光染料标记可以直接进行活体示踪、细胞分选等下游实验操作。原理:荧光标记所依赖的化合物称为荧光物质。荧光物质是指具有共轭双键体系化学结构的化合物,受到紫外光或蓝紫光照射时,可激发成为激发态,当从激发态恢复基态时,发出荧光。蛋白荧光标记利用荧光物质共价结合在目标分子的某个基团上,利用它的荧光性质来提供被研究对象的信息。应用和特点:活化的荧光染料,例如FITC、7-氨基-4-甲基香豆素(AMC)、罗丹明B(Rhodamine B)或Alexa Fluor染料等,可用于标记抗体或蛋白功能基团,生成分子探针并通过荧光成像进行检测。当用荧光染料化学标记性抗体或其他纯化的生物分子时,它们成为用于检测靶抗原或相互作用配偶体的荧光探针,应用于细胞成像、流式细胞术、印迹和酶联吸附实验(ELISA)。因为荧光标记物具有无放射物污染、操作简便等特点,使其在蛋白功能研究、科研筛选等许多研究领域的应用日趋。?荧光标记的蛋白、种类:牛血清白蛋白BSA 人血清白蛋白HAS ?转铁蛋白Transferrin 血蓝蛋白(KLH)刀豆球蛋白Concanavalin A 过氧化氢酶Catalase ?络蛋白Casein 卵清蛋白、乳清蛋白Ovalbumin 组蛋白histone胶原蛋白Collagen链霉亲和素Streptavidin from Streptomyces avidinii氯化血红素;血晶素Hemin牛球蛋白转铁蛋白Transferrins粘蛋白MucinFN纤粘连蛋白Fibronectin乳铁蛋白Lactoferrin玉米蛋白Zein, from Corn硫酸鱼精蛋白Protamine Sulfate from Salmon sperm肌红蛋白(肌球蛋白)Myoglobin马脾铁蛋白HSF肌动蛋白Actin甲状腺球蛋白Thyroglobulin肝素Heparin胰岛素Insulin?文献定制产品:FITC标记的转铁蛋白(Tf-FITC)FITC标记重组灵芝调节蛋白FITC标记的GSTP1蛋白FITC标记链霉亲和素FITC标记蛋白FITC标记卵清蛋白OVAFITC标记牛血清白蛋白BSAFITC标记鬼笔环肽FITC标记I型胶原?荧光素FITC标记牛血清白蛋白FITC-BSA/BSA-FITC的实验操作步骤Albumin-Bovine-Serum-FITC的合成方法及使用材料【产品材料】1、异硫氰酸荧光素(FluoresceinIsothiocyanate,FITC)异构体I(IsomerI),M.W:389.4发射光谱(吸收光谱)493nm,荧光光谱550nm2、牛血清白蛋白(BSA),M.W:68000,纯度98%。(AlbuminBovineSerum)3、标记缓冲液:0.5MpH9.5C.B,洗脱液:0.01MpH7.2PBS?【标记方法】 直接标记法,RT2.5~3.0hs,离心后过SephadexG-50,0.01MpH7.2PBS洗柱,洗脱液为0.01MpH7.2PBS。?【质量分析】 溶液为0.01MpH7.2PBS,蛋白浓度为5.12mg/ml左右,FITC浓度为30~45ug/ml,含有2~5/万NaN3防腐,每支0.5ML。?【保存温度】-20℃冻存二年以上。?【应用范围】1、用于、、梅螺旋体、钩端螺旋体等微生物的抗原或抗体检查。2、自身病的多种自身抗体荧光检查,如抗核抗体,抗心肌抗体等。3、细胞因子等检查的荧光流式细胞仪测定。4、白细胞分型抗原的荧光染色。5、及病理中抗原,抗体检查,如抗原检查。 相关目录: FITC荧光标记活、细胞、微生物、 荧光染料标记FITC-BSA

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