FITC-Transferrin 异硫氰酸荧光素标记转铁蛋白
文章来源 : 齐岳生物
作者:小编zyl
发布时间 : 2026-06-10 16:46:58
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产品名称:FITC-Transferrin 异硫氰酸荧光素标记转铁蛋白
产品描述:
FITC-Transferrin 异硫氰酸荧光素标记转铁蛋白
一、产品概述
FITC-Transferrin FITC-TF 是一种通过异硫氰酸荧光素 Fluorescein Isothiocyanate,FITC 对人转铁蛋白 Transferrin,TF 进行共价荧光标记获得的绿色荧光探针。该产品在保留转铁蛋白天然生物学活性的基础上,引入高灵敏度荧光信号,使其能够用于细胞水平及分子水平的动态追踪与成像分析。
转铁蛋白是一种约80 kDa的血浆糖蛋白,主要负责在体内结合并运输Fe³⁺离子,并通过与细胞膜上的转铁蛋白受体 Transferrin Receptor, TfR/CD71 结合介导铁的内吞摄取。由于TfR在细胞、干细胞及快速增殖细胞中高表达,FITC-Transferrin被广泛用于研究受体介导内吞、铁代谢调控及靶向递送系统。
二、产品标记原理
FITC是一种经典绿色荧光染料,激发波长约495 nm,发射波长约519 nm,具有高量子产率和良好光稳定性。
FITC分子上的异硫氰酸基团 –N=C=S 可与转铁蛋白分子中的伯胺基 主要为赖氨酸残基ε-NH₂ 发生亲核加成反应,形成稳定的硫脲键,从而实现蛋白质的共价标记。
该反应通常在弱碱性条件 pH 8.0–9.0 下进行,以提高反应效率并尽量保持蛋白结构完整性。通过优化FITC与TF的摩尔比,可在保证荧光强度的同时避免过度标记导致的生物活性下降。
三、产品特性
1. 高荧光灵敏度
FITC提供稳定绿色荧光信号,适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜及流式细胞术检测。
2. 保持天然生物活性
转铁蛋白在标记后仍可正常结合TfR受体并参与铁离子转运过程。
3. 良好的水溶性
产品可溶于PBS等常规生理缓冲体系,适用于多种细胞与体外实验体系。
4. 稳定性较高
共价标记结构稳定,不易发生荧光淬灭或染料脱落,提高实验重复性。
5. 背景信号低
经过纯化处理,有效去除游离FITC,提高成像对比度。
四、作用机制
FITC-Transferrin通过模拟天然转铁蛋白的生理行为,与细胞表面的TfR结合后被内吞进入细胞内。其主要路径为:
FITC-TF结合TfR CD71
形成受体-配体复合物
通过网格蛋白介导内吞进入内体
在内体酸性环境中释放铁离子
TfR与TF循环回细胞膜
FITC信号用于追踪整个内吞与回收过程
该机制使FITC-TF成为研究受体介导内吞循环的重要工具分子。
五、应用领域
1. 受体介导内吞研究
广泛用于观察TfR介导的内吞过程,分析内吞动力学及细胞摄取能力。
2. 铁代谢与细胞营养研究
用于追踪铁离子进入细胞的运输路径及铁稳态调控机制。
3. 靶向研究
由于细胞TfR高表达,FITC-Transferrin常用于验证靶向纳米载体、*体或药物系统的受体识别能力。
4. 荧光成像分析
适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜以及活细胞动态成像实验。
5. 流式细胞术分析
用于定量检测细胞表面TfR表达水平及摄取能力。
6. 药物递送系统评价
常用于纳米药物、脂质体及聚合物载体的靶向性能验证。
六、使用方法 参考
将FITC-Transferrin溶解于无菌PBS缓冲液 pH 7.2–7.4 。
按实验需求稀释至1–100 μg/mL范围。
加入细胞培养体系中,在37℃条件下孵育30 min–2 h。
用PBS洗涤去除未结合探针。
使用荧光显微镜或流式细胞仪进行检测分析。
具体浓度与时间需根据细胞类型优化
七、保存条件与稳定性
保存温度:-20℃避光保存
避免反复冻融
使用时避免强光照射
建议分装保存以提高稳定性
在适当条件下可稳定保存6–12个月
八、注意事项
FITC对光敏感,应避光操作以防荧光衰减。
避免高温及端pH条件,以防蛋白结构破坏。
建议使用无胺缓冲体系 避免Tris等干扰FITC反应 。
标记密度过高可能影响TfR结合能力,应优化染料/蛋白比例。
实验中应设置未标记TF或FITC对照组以提高结果可信度。
九、产品优势总结
FITC-Transferrin结合了转铁蛋白天然受体靶向能力与FITC高灵敏荧光特性,是研究铁代谢、受体介导内吞及靶向递送体系的重要工具分子。其具有操作简便、信号稳定、生物相容性好、应用范围广等特点,尤其适用于细胞生物学、纳米医学及药物递送领域的基础与转化研究。
西安齐岳生物科技有限公司专注于科研级荧光标记材料及功能化生物材料的研发与供应,可提供多种荧光染料及标记产品,包括FITC、Cy3、Cy5、Cy5.5、Cy7、罗丹明、吲哚菁绿(ICG)、Ce6等系列荧光探针,并支持多糖、PEG、脂质、蛋白、多肽及纳米材料的荧光标记与定制服务。其荧光标记材料具有发光性能稳定、灵敏度高、生物相容性良好等特点,广泛应用于细胞示踪、活体成像、药物递送、分子识别、生物检测及纳米医学等研究领域。公司可根据客户实验需求提供不同分子量、不同修饰基团及多种荧光波长的产品方案,为生命科学和生物医药研究提供可靠的材料支持。
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