罗丹明-刀豆球蛋白A RB-ConA 罗丹明标记刀豆球蛋白A

产品名称：罗丹明-刀豆球蛋白A RB-ConA 罗丹明标记刀豆球蛋白A

产品描述：

罗丹明-刀豆球蛋白A，RB-ConA,罗丹明标记刀豆球蛋白A

一、产品概述

RB-ConA 是将 红色荧光染料罗丹明 B（Rhodamine B, RB） 与 刀豆球蛋白A（Concanavalin A, ConA） 共价偶联的荧光标记蛋白。ConA 是一种来源于刀豆（Canavalia ensiformis）的植物凝集素，属于四聚体糖蛋白，具有 特异性结合 α-D-甘露糖和 α-D-葡萄糖残基 的能力，因此在细胞膜糖蛋白识别、糖链结构分析及细胞表面糖受体研究中具有重要作用。

通过罗丹明 B 标记，ConA 获得 明亮红色荧光信号（激发波长约 540–555 nm，发射波长约 565–580 nm），使其在 细胞成像、流式细胞术、糖蛋白识别及受体结合研究 中可视化、定量化。RB-ConA 结合了 ConA 的天然糖结合功能与罗丹明 B 的高亮荧光特性，为科研实验提供高灵敏度和可视化的研究工具。

二、分子结构与标记原理

RB-ConA 分子结构主要由三部分组成：

荧光模块（Rhodamine B）

罗丹明 B 是一种红色荧光染料，激发波长约 540–555 nm，发射波长约 565–580 nm。

荧光强度高、光稳定性良好，可实现长时间成像实验。

蛋白模块（ConA）

ConA 为四聚体糖结合蛋白，特异性识别 α-D-甘露糖和 α-D-葡萄糖残基。

在细胞膜糖蛋白识别、糖链分析及糖受体研究中具有广泛应用。

化学连接模块

罗丹明 B 通过活化羧基（如 NHS ester）与 ConA 赖氨酸氨基共价偶联，形成稳定酰胺键。

偶联过程中可调节染料与蛋白摩尔比，确保荧光强度与蛋白功能兼顾。

这种设计保证 RB-ConA 荧光信号明亮、糖结合功能保留、结构稳定，适用于多种体外与体内实验。

三、制备方法

RB-ConA 的制备一般包括以下步骤：

1. 罗丹明 B 活化

将罗丹明 B 转化为 NHS ester 或 Sulfo-NHS ester，可与蛋白氨基形成稳定共价键。

2. 偶联反应

在 PBS 或碳酸盐缓冲液（pH 7.4–8.5）中，将活化的罗丹明 B 与 ConA 混合。

羰基酯与 ConA 赖氨酸氨基反应，形成稳定酰胺键。

反应一般在低温（4℃）和避光条件下进行，以保护蛋白结构和荧光性能。

3. 纯化

通过透析、凝胶过滤或超滤去除未反应的染料。

得到高纯度 RB-ConA，保持蛋白完整性及荧光特性。

4. 表征

紫外-可见光谱：罗丹明 B 特征吸收峰约 540–555 nm

荧光光谱：发射峰约 565–580 nm

SDS-PAGE：检测蛋白完整性

标记度测定（DOL）：确定每个 ConA 分子偶联的染料数量

通过这些表征方法，可确保 RB-ConA 的荧光性能、蛋白活性及纯度满足实验要求。

四、理化性质

激发波长（Ex）：约 540–555 nm

发射波长（Em）：约 565–580 nm

外观：红色冻干粉末或溶液

溶解性：可溶于 PBS、Tris 缓冲液及水性溶液

储存条件：−20℃ 避光保存

稳定性：低温避光条件下荧光和蛋白功能稳定

RB-ConA 在水溶液和生物体系中均表现出优良的稳定性，适合多种实验条件。

五、产品特点

红色明亮荧光：便于细胞及组织观察，适合与绿色荧光染料联合成像。

保留糖结合功能：ConA 的 α-D-甘露糖及 α-D-葡萄糖结合能力完整。

多用途应用：适用于细胞膜糖蛋白研究、流式细胞术、免疫荧光及蛋白示踪。

光稳定性好：*光漂白，可进行长时间成像实验。

高纯度低非特异性吸附：实验信号可靠、特异性高。

六、主要应用领域

1. 糖蛋白识别与细胞膜受体研究

RB-ConA 可特异性识别细胞膜表面的 α-D-甘露糖和 α-D-葡萄糖残基。

可用于检测糖蛋白分布、受体结合及细胞表面糖链分析。

2. 细胞成像与共聚焦显微镜

可观察 ConA 在细胞膜或细胞内分布情况。

红色荧光与其他染料通道组合，可实现多通道成像。

3. 流式细胞术

可用于定量分析细胞表面糖受体表达水平。

可在多色流式体系中进行糖蛋白检测。

4. 蛋白动力学与示踪

可用于研究 ConA 在细胞或组织内的摄取、运输及代谢过程。

有助于评估蛋白-受体相互作用和内吞动力学。

5. 生物材料及纳米医学研究

可用于评估糖蛋白与材料表面的结合及靶向能力。

七、实验使用建议

避光操作：罗丹明 B 对光敏感，实验操作需避光。

缓冲液选择：推荐 PBS 或 Tris，避免含强还原剂或高浓度游离氨基。

温度控制：低温（4℃）操作可保持蛋白结构及荧光性能。

浓度优化：根据实验需求调整工作浓度，保证信号清晰且糖结合功能完整。

分装储存：冻干分装可延长使用寿命，避免反复冻融。

八、总结

RB-ConA（罗丹明标记刀豆球蛋白A） 是结合 ConA 天然糖结合功能与罗丹明 B 红色荧光特性 的高性能荧光标记蛋白。通过红色荧光信号，可在体外研究 ConA 的糖蛋白识别、细胞膜结合及内吞过程，同时保留蛋白的天然功能。

凭借 明亮红色荧光、糖结合功能完整、光稳定性好及多用途应用，RB-ConA 广泛应用于 细胞膜糖蛋白研究、流式细胞术、共聚焦显微镜、蛋白动力学及纳米材料靶向研究，为生命科学和生物医学实验提供可靠、可视化的实验工具。

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