Cy3/Cy5/Cy5.5/Cy7荧光标记抗体/蛋白试剂盒(10~100mg标记量)
产品名称:Cy3/Cy5/Cy5.5/Cy7荧光标记抗体/蛋白试剂盒(10~100mg标记量)
产品描述:
Cy3/Cy5/Cy5.5/Cy7荧光标记抗体/蛋白试剂盒(10~100mg标记量)
荧光标记技术是把荧光基团的共价键连接到蛋白、核酸等能够识别分子物质上的一种技术。这种技术通过了荧光的信号物质的特定基团,与识别分子物质的特定基团反应,从而完成其标记过程,利用标记物的荧光特性,来提供被检测对象的信号。
荧光标记方法具有如无放射性、操作简单、高灵敏度和较好选择性等优点。荧光标记物种类多、标记方法灵活,可应用于多种生物大分子以及药物的检测。和齐岳生物小编一起来看Cy3/Cy5/Cy5.5/Cy7荧光标记抗体/蛋白试剂盒(10~100mg标记量)。
荧光标记抗体/蛋白试剂盒
产品概述
Cy3/Cy5/Cy5.5/Cy7偶联试剂盒可以通过抗体/蛋白上的伯胺基团(如赖氨酸),简单、快速地实现抗体/蛋白与Cy5/Cy5.5/Cy7的共价偶联。
此为通用型试剂盒,适合各种分子量不一致的抗体/蛋白偶联Cy3/Cy5/Cy5.5/Cy7。偶联在30分钟内即可完成,偶联效率可达70%左右。使用超滤管纯化,可快速去除多余Cy3/Cy5/Cy5.5/Cy7,且不会损失抗体/蛋白。
优点
1.操作便捷,反应快速。
2.偶联效率高,且延长反应时间不影响偶联效率。
3.此为通用型试剂盒,适合各种分子量不一致的抗体/蛋白偶联Cy3/Cy5/Cy5.5/Cy7。
4.实验结果重现性好。
试剂盒组成与存储
收到后将Cy3/Cy5/Cy5.5/Cy7-mix(含10%Cy3/Cy5/Cy5.5/Cy7染料)储存在-20⁰C,Coupling Reagent、溶解液可在+4°C短期保存或-20°C长期保存。
试剂盒组成 | 数量 | 保存温度 |
Cy3/5/Cy5.5/Cy7mix(含10%Cy3/Cy5.5/Cy7) | 10mg | -20℃ |
Coupling Reagent | 2mL | +4℃或-20℃ |
Cy3/Cy5/Cy5.5/Cy7-mix溶解液 | 2mL | +4℃或-20℃ |
超滤管(3.5kD) | 2支 | 室温 |
实验步骤
1.取待标记抗体/蛋白(1~10mg),溶解于1mL纯水中,加入100μLCoupling Reagent,混合均匀待用。
注:抗体/蛋白在1~10mg内均用1mL纯水溶解,并加入100μLCoupling Reagent。超出此范围,请按比例增减,如0.5mg抗体/蛋白,建议使用0.5mL纯水溶解并加入50μLCoupling Reagent。
(以下步骤按标记1mg抗体/蛋白为例)
2.根据荧光标记需求程度,称取0.1~1mgCy3/Cy5/Cy5.5/Cy7-mix固体加至第1步溶液,充分混合溶解。
注:(a)若Cy3/Cy5/Cy5.5/Cy7-mix用量超出1mg,可能导致荧光标记过量,引起荧光部分淬灭;
(b)若低于1mg的Cy3/Cy5/Cy5.5/Cy7-mix难以称取,可先取1mg Cy3/Cy5/Cy5.5/Cy7-mix固体溶解于100μLCy3/Cy5/Cy5.5/Cy7-mix溶解液,再按需取Cy3/Cy5/Cy5.5/Cy7-mix溶液加至第1步溶液。由于Cy3/Cy5/Cy5.5/Cy7-mix溶解后易分解,溶液须尽快使用且不可保存。
3.室温避光反应30min,延长反应时间不影响偶联效率。
4.将反应液转移至超滤管,10000rpm超滤5min,即可除去未反应的Cy3/Cy5/Cy5.5/Cy7-mix,为提高纯度,可加入纯水重悬抗体/蛋白,重复超滤1~2次。
5.使用纯水或PBS将超滤管截留下的抗体/蛋白重悬,即得到Cy3/Cy5/Cy5.5/Cy7荧光标记的抗体/蛋白溶液。
注意事项
1.偶联前抗体/蛋白中可能含有成分,建议低于以下比例:
组分 | 建议比例 |
甘油 | <50% |
叠氮化钠 | <0.1% |
含氨基的缓冲液(如Tris) | 0 |
pH | 7.0-8.5 |
伯胺(如氨基酸、乙醇胺等) | 0 |
硫醇(如巯基乙醇、DTT等) | 0 |
注:若以上干扰组分超出建议比例,可先通过超滤管或透析等方式除去干扰成分,再使用本试剂盒进行抗体/蛋白荧光标记。
2.偶联后的抗体/蛋白应避光保存。通常在4℃下可保存6~12个月。如需保存更长时间,可加入冷冻保护剂如50%甘油,在-20℃保存。
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