CY5-3-IAA CY5标记3-吲哚乙酸 荧光标记3-吲哚乙酸
产品名称：CY5-3-IAA CY5标记3-吲哚乙酸 荧光标记3-吲哚乙酸
产品描述：
CY5-3-IAA CY5标记3-吲哚乙酸 荧光标记3-吲哚乙酸
一、产品概述
CY5-3-IAA 是一种以植物生长激素 3-吲哚乙酸（Indole-3-acetic acid, IAA） 为核心分子，通过共价连接高荧光素 Cy5（Cyanine 5） 而构建的荧光标记化合物。通过引入 Cy5 荧光基团，使 IAA 分子具备强荧光信号，可用于细胞成像、生物分子相互作用研究、受体结合分析、代谢追踪等生命科学科研领域。
3-吲哚乙酸是典型、重要的天然植物生长素（auxin），在植物体内参与细胞伸长、分化、分枝、重力感应、光响应等多种生长过程。CY5 标记后的 IAA 保持了其生物活性基础，同时具备荧光可视化的特性，为研究 IAA 在细胞与组织中的定位、转运路径、受体结合及信号传导机制提供了大便利。
二、分子结构及特性
CY5-3-IAA 的分子结构主要由以下两个部分组成：
3-吲哚乙酸（IAA）部位
该部分为天然植物激素结构，含有吲哚环和乙酸侧链，具有典型的 auxin 活性。
Cy5 荧光基团
Cy5 属于 cyanine 类荧光染料，具有如下特性：
激发波长约 646 nm
发射波长约 662–670 nm
高量子产率、强荧光信号
在红/近红外区域发射，背景低、穿透好
通过化学合成将 Cy5 分子与 IAA 分子通过稳定的共价键连接，使荧光基团与生物活性分子共存。
三、主要生物化学性质
性质 描述
外观 深蓝色至紫色粉末或冻干粉
溶解性 可溶于 DMSO、DMF，微溶于水（推荐先溶于 DMSO 再稀释）
存储条件 建议 -20 °C 避光保存
激发/发射 646 / 662–670 nm（近红外区）
亲和性 保持 IAA 对 auxin 受体的基本结合能力
稳定性 在暗条件、低温下较稳定
四、设计与合成原理
CY5-3-IAA 的合成基于以下关键设计思想：
保持 IAA 的结构完整性
3-吲哚乙酸的吲哚环与乙酸链是其生物活性基础，标记设计中应尽量避免影响活性位点（如侧链的α-碳等）。
引入高亮度荧光基团
选择 Cy5 是因为其在细胞自发荧光干扰较低的红外区发射，适合用于细胞、组织深部成像、FACS 及多色荧光实验。
采取适配性链接策略
通常利用 IAA 上可修饰的羧基（-COOH）经过活化，与 Cy5 染料上的氨基或其他可反应基团发生酰胺化反应，生成稳定共价衔接。
五、主要应用场景与优势
CY5-3-IAA 作为荧光标记植物激素衍生物，在以下科研领域具有重要应用价值：
1. 植物细胞定位与转运研究
借助 Cy5 的荧光，可在共聚焦显微镜下直观观察 IAA 在细胞、器官中的分布与动态变化，从而深入理解 auxin 在性运输、细胞分化区域的分布特点。
2. 受体结合分析
通过荧光强度变化、共聚焦定位、FRET 或 SPR 等生物物理技术，检测 CY5-3-IAA 与植物细胞 auxin 受体（如 TIR1/AFB 等）的结合亲和力、动力学以及竞争机制。
3. 荧光定量追踪与显微成像
在活体或固定样本中利用红外荧光波段成像（减少自发荧光干扰），准确、实时地跟踪 hormon 在组织中的分布、积累、降解动力学。
4. 生长素信号通路研究
可结合基因突变株、药物处理及受体抑制剂，通过荧光强度差异分析生长素信号通路中关键蛋白的响应过程。
5. 高通量筛选
在 96-孔板、流式细胞术中利用荧光变化筛选影响 IAA 受体结合的小分子调节剂或抑制剂。
六、使用方法与检测建议
1. 溶解与配制
将冻干粉溶于 DMSO 制备 1–10 mM 储备液。
避光操作，分装保存 -20 °C。
实验中尽量稀释至终工作浓度（如 0.1–10 μM）并保证 DMSO 终体积分数 < 0.5%（避免细胞毒性）。
2. 成像参数建议
激发：~640–650 nm 激光线
收集发射：~660–680 nm
建议使用长通滤光片或窄带滤光片提高信噪比。
3. 对照设置
采用未标记 IAA 对照组
荧光背景对照（不加 CY5-3-IAA）
荧光淬灭、光漂白评估
4. 数据分析
常用图像分析软件（如 ImageJ、ZEN、Imaris 等）进行强度测量、定位分析与共定位定量。
七、优势总结
优势类别 说明
信号强度高 Cy5 荧光强、背景低
穿透力好 红外激发/发射减少自发荧光影响
生物活性保持 保留 IAA 与受体的基本结合能力
可视化直观 可直接在显微镜下动态观察
八、注意事项
光敏感性：CY5 基团对光敏感，操作时尽量避光，防止荧光衰减。
溶解性：直接溶于水可能析出或聚集，推荐先用 DMSO 溶解再稀释。
细胞毒性：高浓度 DMSO 或标记化合物可能对细胞有一定影响，建议做浓度梯度预实验。
批次差异：荧光标记效率受合成批次影响，请根据实验调整剂量与检测条件。
九、典型实验案例与成果
研究者可参考以下类型工作示例：
CY5-IAA 在拟南芥根尖中的实时追踪：通过共聚焦显微镜，观察 CY5-IAA 在根尖区域的性运输及 PIN 蛋白介导的转运路径变化。
结合 FRET 研究 auxin 受体结合动力学：采用 CY5-IAA 与 GFP-标记的受体进行能量传递效率测量，解析结合亲和性与时间过程。
高通量筛选 auxin 调节剂：利用 96-孔板荧光读板器监测 CY5 信号强度变化，筛选影响 IAA 结合的潜在化合物。
十、总结
CY5-3-IAA 是一种集生物活性与高灵敏荧光检测能力于一体的高端科研试剂。它不仅保留了天然 3-吲哚乙酸作为植物激素的生物学功能，还通过 Cy5 荧光标签大幅提升了可视化追踪与量化检测性能。无论是在细胞成像、信号通路解析，还是在生物物理结合分析与高通量筛选中，CY5-3-IAA 都是一种具价值的工具分子，可为植物学、分子生物学、细胞生物学等领域的科研提供强有力支撑。
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