DIR-NHS N-羟基琥珀酰亚胺活化近红外荧光染料
产品名称:DIR-NHS N-羟基琥珀酰亚胺活化近红外荧光染料
产品描述:
DIR-NHS N-羟基琥珀酰亚胺活化近红外荧光染料
DIR-NHS是一种以近红外花菁类染料DiR为核心结构,并经N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)活化修饰而成的高反应性荧光标记试剂。该产品兼具优异的近红外荧光性能与高效的氨基偶联能力,广泛应用于蛋白质、多肽、*体、纳米材料及其他生物分子的荧光标记,是体内外成像研究、分子示踪分析以及生物偶联技术中的重要工具试剂。
一、产品原理与结构特点
DIR(DiR)属于长链脂溶性花菁类近红外染料,具有较高摩尔消光系数和量子产率,在生物组织中具有良好的穿透能力和较低背景干扰。通过将其羧基结构与N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)形成活性酯,即得到DIR-NHS活化酯形式,使其能够与含伯胺(–NH₂)基团的分子发生快速高效的酰胺化反应。
DIR-NHS的核心优势在于:
保持DiR染料优良的近红外发射特性
通过NHS活化酯实现温和条件下高效偶联
偶联产物稳定,不易水解
该结构设计使其成为生物偶联领域常用的“即用型”活性染料。
二、光谱特性
DIR-NHS属于近红外荧光染料,适用于活体成像和深层组织检测。典型光谱参数如下:
激发波长(Ex):约 740–750 nm
发射波长(Em):约 770–780 nm
摩尔消光系数:高于10⁵ M⁻¹cm⁻¹
量子产率:稳定可靠
组织自发荧光干扰:低
近红外区间(700–900 nm)通常被称为“生物窗口”,在此波段生物组织吸收和散射较低,因此DIR-NHS尤其适合小动物活体成像和体内示踪实验。
三、化学与理化性质
外观:深绿色或蓝黑色固体/冻干粉
分子类型:DiR-NHS活化酯
溶解性:易溶于DMSO、DMF等无水有机溶剂
反应对象:含伯胺的蛋白质、*体、多肽、氨基修饰纳米颗粒
推荐反应pH:7.5–8.5
储存条件:-20℃避光保存
由于NHS酯对水分敏感,建议在干燥、无水环境下操作,避免长时间暴露于空气中。
四、产品优势
1. 高效偶联反应
DIR-NHS在温和条件下即可与蛋白质赖氨酸残基快速形成稳定酰胺键,无需复杂催化体系。
2. 近红外高灵敏成像
相比FITC、TRITC等可见光染料,DIR-NHS标记物背景低、穿透深度大,更适用于体内研究。
3. 优良光稳定性
花菁类结构赋予其良好的光稳定性,适合长时间成像及重复扫描。
4. 广泛兼容性
可与多种生物分子偶联,包括*体、蛋白酶、细胞膜蛋白、纳米脂质体及高分子材料。
五、应用领域
(一)活体小动物成像
DIR-NHS标记*体或纳米载体后,可用于肿瘤靶向研究、药物分布追踪和代谢动力学分析。
(二)蛋白与*体标记
通过与*体偶联,可构建近红外荧光探针,用于Western blot、免疫荧光、流式细胞术等实验。
(三)纳米材料示踪
在纳米脂质体、聚合物纳米粒或外泌体表面引入DIR荧光信号,便于体内分布和靶向评估。
(四)药物递送系统研究
通过DIR-NHS标记递送系统,可直观观察其在动物体内的累积与清除过程。
六、使用方法建议
取适量DIR-NHS溶于无水DMSO配制储备液(1–10 mM)。
将待标记蛋白溶于pH 7.5–8.5缓冲液(如PBS或碳酸盐缓冲液)。
按一定摩尔比加入DIR-NHS溶液,避光反应30–120分钟。
通过透析或凝胶过滤去除未反应染料。
测定标记度(Degree of Labeling, DOL)以评估标记效率。
注意控制染料与蛋白的比例,避免过度标记影响蛋白活性。
七、质量控制标准
HPLC纯度检测(≥95%)
质谱确认分子量
紫外/荧光光谱检测
批次稳定性验证
每批产品均提供质量检测报告,确保科研实验稳定可靠。
八、安全与注意事项
本品仅限科研使用。
避光保存,避免反复冻融。
操作时佩戴手套及防护用品。
废弃物按照化学试剂规范处理。
九、产品总结
DIR-NHS作为一种高性能近红外活化酯荧光染料,结合了DiR优异的光学性能与NHS酯高效偶联特性,在生物标记与体内成像领域具有广泛应用前景。其低背景、高灵敏、深层组织穿透能力,使其成为分子影像学、纳米医学及准医疗研究中的重要工具。通过合理设计偶联方案,可构建多种功能化荧光探针,为生命科学研究提供稳定、可靠的技术支持。
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