近红外荧光素Cy7.5标记鱼精蛋白;Cy7.5-protamine;Cyanine7.5-PSP
产品名称:近红外荧光素Cy7.5标记鱼精蛋白;Cy7.5-protamine;Cyanine7.5-PSP
产品描述:
名称:近红外荧光素Cy7.5标记鱼精蛋白
纯度:98%
包装:mg级和g级
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
产地:西安
储存时间:1年
保存:冷藏
厂家:西安齐岳生物科技有限公司
温馨提醒:仅供科研,不能用于人体实验
标记方法
NHS酯化学标记法是将Cy7.5与鱼精蛋白偶联的常见方式:
Cy7.5-NHS酯的制备:
- Cy7.5通常以NHS酯形式进行标记,这种形式可以与鱼精蛋白中的氨基基团(如精氨酸或赖氨酸上的氨基)反应形成稳定的酰胺键。
偶联反应:
- 将Cy7.5-NHS酯溶解于无水有机溶剂如DMSO或DMF中。
- 在pH 8.0-9.0的碳酸氢钠缓冲液中溶解鱼精蛋白,以保持反应所需的碱性环境。
- 缓慢加入Cy7.5-NHS酯溶液到鱼精蛋白溶液中,在避光条件下搅拌反应1-2小时,确保染料与鱼精蛋白的充分结合。
纯化步骤:
- 通过透析或凝胶过滤去除未结合的Cy7.5染料,使用适合的分子量截断的透析膜(如3 kDa)以保留标记后的鱼精蛋白。
- 纯化过程中应多次更换透析液,以确保游离染料被彻底清除。
表征与验证:
- 紫外-可见分光光度计:检测Cy7.5的特征吸收峰(在770-800 nm左右),以确认标记成功。
- 荧光分光光度计:检测其发射光谱,确认近红外荧光的强度和特性。
- SDS-PAGE或HPLC:用于验证偶联产物的纯度,确保标记的鱼精蛋白没有降解或聚集。
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