染料Cy5.标记的胰岛素(FITC-胰岛素)
产品名称:染料Cy5.标记的胰岛素(FITC-胰岛素)
产品描述:
名称:染料Cy5.标记的胰岛素(FITC-胰岛素)
纯度:98%
包装:mg级和g级
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
产地:西安
储存时间:1年
保存:冷藏
厂家:西安齐岳生物科技有限公司
温馨提醒:仅供科研,不能用于人体实验
标记反应
NHS酯法进行标记:
Cy5.5-NHS酯制备:
- Cy5.5染料通常以NHS酯形式使用,因为NHS酯能与蛋白质中的游离氨基(如赖氨酸残基的氨基)快速反应,形成稳定的共价键。
胰岛素与Cy5.5-NHS的反应:
- 将Cy5.5-NHS酯溶解于少量无水DMSO中。
- 将胰岛素溶解于pH 8.5的碳酸氢钠缓冲液中,以确保反应条件适合NHS酯与胺基反应。
- 在不断搅拌下,逐滴加入Cy5.5-NHS溶液到胰岛素溶液中,并在避光条件下反应1-2小时。
去除未结合的Cy5.5染料:
- 使用透析法或凝胶过滤柱去除未结合的游离Cy5.5-NHS染料。
- 透析可以在4℃下进行,使用适当分子量切断的透析膜。
标记效率的检测:
- 使用紫外-可见分光光度计检测吸光度,以确认Cy5.5的结合,并计算标记效率。
- 一般来说,通过检测Cy5.5的特征吸收峰(680-700 nm)以及胰岛素的吸光度,可以评估标记的效果。
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